商品详情：

产品简介：

海肾萤光素酶是一种分子量约为36kD的蛋白，在氧气存在的条件下，可以催化Coelenterazine氧化成Coelenteramide。在Coelenterazine氧化的过程中，会发出生物萤光。生物萤光可以通过化学发光仪或液闪测定仪进行测定。通过萤光素和萤光素酶这一生物发光体系，可以非常灵敏、高效地检测基因的表达。通常把感兴趣基因的转录调控元件或5'启动子区克隆在luciferase的上游，或把3'-UTR区克隆在luciferase的下游等，构建成报告基因质粒。然后转染细胞，用适当药物等处理细胞后裂解细胞，测定萤光素酶活性。通过萤光素酶活性的高低来判断药物处理等对目的基因的转录调控作用。海肾萤光素酶一方面常用作萤火虫萤光素酶报告基因检测的内参，以消除由于质粒的转染效率不同而带来的误差；另一方面海肾萤光素酶也可以和萤火虫萤光素酶一样被用于常规的报告基因检测。

海肾萤光素酶报告基因检测试剂盒是一种以肠腔素(Coelenterazine)为底物来检测海肾萤光素酶活性的试剂盒。海肾萤光素酶催化Coelenterazine发光的最强发光波长为465nm。

产品特点：

操作简单，检测速度快，从样品制备到完成检测仅需约20分钟：只需把试剂盒提供的海肾萤光素酶检测底物和海肾萤光素酶检测缓冲液按照1:100的比例混合配制成海肾萤光素酶检测工作液，再取100μl海肾萤光素酶检测工作液与20-100μl裂解制备的细胞样品混合后即可立即进行化学发光检测。

稳定性好：本试剂盒中的海肾萤光素酶检测缓冲液和海肾萤光素酶检测底物（100×）的稳定性均较好。海肾萤光素酶检测缓冲液反复冻融10次、4ºC或室温保存3天对检测效果基本无影响，37ºC保存1天仍可保留90%以上的检测效果。海肾萤光素酶检测底物（100×）在4ºC保存1周、室温保存1天检测效果下降不超过10%，室温保存3天、37ºC保存1天，仍可保留80%以上的活力。

产品组分：

使用方法：请参考说明书

注意事项：

1、海肾萤光素酶报告基因细胞裂解液和海肾萤光素酶检测缓冲液，4℃保存3个月有效，-20℃保存一年有效；海肾萤光素酶检测底物（100×），-20℃避光保存6个月有效，-80℃避光保存一年有效。

2、海肾萤光素酶检测工作液宜配制后立即使用。如不能立即使用，-20℃可以保存一周。随着保存时间的延长检测效果会不断下降，因此不可配制成工作液后长期保存。

3、为取得最佳测定效果，在用单管的化学发光仪测定时，样品和测定试剂混合后到测定前的时间应尽量控制在相同时间内，例如30秒内；使用具有化学发光测定功能的多功能荧光酶标仪时，宜先把样品全部加好，然后统一加入海肾萤光素酶检测工作液。

4、本试剂盒的海肾萤光素酶检测缓冲液在反复冻融过程中，可能会导致检测试剂中出现少量沉淀，此时宜平衡至室温，并尽量溶解。如仍有残留的不溶物，混匀后直接使用，经测试通常不会影响后续的检测效果。

5、由于萤光素酶的活性对温度比较敏感，所以反应前样品和检测试剂均需达到室温后再进行测定。

6、样品和测定试剂混合后，必须等待1-2秒，再进行测定。测定时间通常为10秒，根据情况也可以测定更长或更短时间，但是同一批样品宜使用相同的测定时间。

7、检测时需使用白色或黑色的96孔板。如果使用普通透明的96孔板，相邻孔之间会产生相互干扰。

8、海肾萤光素酶检测底物（100×）配制在无水乙醇中。由于无水乙醇容易挥发，有时会在初次使用时发现体积明显小于100µl的情况，此时用无水乙醇把体积补足至100µl，并混匀后即可使用。

9、本产品仅限于专业人员的科学研究用，不得用于临床诊断或治疗，不得用于食品或药品，不得存放于普通住宅内。

10、为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

保存条件：

-80℃避光保存，一年有效。