商品详情:
产品简介:
β-半乳糖苷酶报告基因检测试剂盒是一种用于β-半乳糖苷酶报告基因检测的试剂盒。β-半乳糖苷酶是一种常用的报告基因分子,经常与荧光素酶报告基因一起转染细胞,被用作荧光素酶报告基因检测的内参照,从而消除因为质粒的转染效率不同而带来的误差。我们的β-半乳糖苷酶报告基因检测试剂盒是以无色的ONPG为底物,在β-半乳糖苷酶的催化下生成黄色的o-nitrophenol,然后通过酶标仪或分光光度计在420nm波长附近测定吸光度,从而实现对β-半乳糖苷酶活性的测定。
产品组分:
产品编号 | 产品名称 | 规格 | 保存条件 |
BL1617A-1 | 报告基因细胞裂解液 | 100ml | -20°C,避光 |
BL1617A-2 | β-半乳糖苷酶检测试剂 | 10ml | -80℃,避光 |
BL1617A-3 | β-半乳糖苷酶反应终止液 | 35ml | -20°C,避光 |
使用方法:
1、裂解细胞:按如下方式加入报告基因细胞裂解液,充分裂解细胞。细胞裂解后可以立即测定β-半乳糖苷酶活性,也可以先冻存,待以后再测定。冻存的样品需融解,并达到室温后才可以开始测定。建议使用12、24或48孔板进行报告基因检测。
器皿类型 | 96孔板 | 48孔板 | 24孔板 | 12孔板 | 6孔板 |
报告基因细胞裂解液(μl/孔) | 100 | 150 | 200 | 300 | 500 |
2、融解β-半乳糖苷酶检测试剂,并达到室温。充分融解β-半乳糖苷酶反应终止液,如有难溶结晶,请在37℃水浴溶解。
3、在96孔板中,分别加入5-50μl样品,然后加入报告基因裂解液至最后体积为50μl。由于不同的细胞体系,不同的转染方法的转染效率相差很大。在第一次测定时推荐取两个样品作预实验。在96孔板中,分别加入0μl,5μl,10μl,25μl,50μl样品,然后加入报告基因裂解液至最后体积为50μl。
4、在每个孔中加入β-半乳糖苷酶检测试剂50μl,混合后,盖上96孔板的盖子。可以用保鲜膜封住96孔板防止蒸发。在37℃放置30分钟或直至样品孔内出现浅黄色。通常大约3小时后,吸光度达到平台,孵育更长时间吸光度不会明显升高。
5、加入150μl β-半乳糖苷酶反应终止液终止反应,混匀,尽量避免气泡。
6、按仪器操作说明书开启酶标仪或分光光度计,将测定波长设定为420nm,测定吸光度。
注意事项:
1、最佳测定波长为420nm。在410-430nm范围内测定,具有相近的灵敏度。
2、本检测试剂盒和Promega荧光素酶报告基因的裂解液兼容。用Promega荧光素酶报告基因裂解液裂解的样品可以用本试剂盒测定。
3、本产品仅限于专业人员的科学研究用,不得用于临床诊断或治疗,不得用于食品或药品,不得存放于普通住宅内。
4、为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
保存条件:
-80℃避光保存,一年有效。
货号 | BL1617A |
规格 | 200T |
品牌 | Biosharp |
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