产品简介:
博莱霉素(Zeocin)是以Phleomycin D1为主要有效成分,又称为博来霉素、盐酸博来霉素或者腐草霉素D1,是从轮状链霉菌(Streptomyces verticillus)的一个突变体菌株中分离而来的博来霉素/腐草霉素(Bleomycin/phleomycin)的抗生素家族成员。它对细菌、真菌、植物和哺乳动物细胞均有抑制作用和细胞毒性,常用于筛选表达Zeocin抗性基因的多克隆或单克隆细胞,或用于相应的多克隆或单克隆细胞的维持性培养。大肠杆菌筛选推荐浓度为25~50μg/ml(低盐LB培养基,NaCl浓度不能超过5g/L),酵母筛选推荐浓度为50~300μg/ml,哺乳动物细胞筛选推荐浓度为50~1000μg/ml(平均常用浓度为250-400μg/ml)。
本产品配制在HEPES溶液中,浓度为100mg/ml,经滤膜过滤除菌,可以直接用于细胞培养。
使用方法(仅供参考):
本产品通常以100 μg/ml的浓度使用,比原液稀释1000倍。然而,影响筛选浓度的主要因素包括离子强度、细胞类型、细胞生长密度以及生长速率等。根据细胞类型的不同,需要1-2周可以筛选到Zeocin抗性的细胞,最佳工作浓度需要通过剂量效应曲线来确定。下面列出了一些哺乳动物细胞中的推荐浓度。
Cell line | Medium | Concentration |
B16 (Mouse melanocytes) | RPMI | 20-250 µg/ml |
CHO (Chinese hamster ovarian cells) | DMEM | 100-500 µg/ml |
COS (Monkey kidney cells) | DMEM | 100-400 µg/ml |
HEK293 (Human embryonic kidney cells) | DMEM | 100-400 µg/ml |
HeLa (Human uterine cells) | DMEM | 50-100 µg/ml |
J558L (Mouse melanocytes) | RPMI | 400 µg/ml |
MCF-7 (Human breast adenocarcinoma cells) | DMEM | 100-400 µg/ml |
MEFs (Mouse embryonic fibroblasts) | DMEM | 200-400 µg/ml |
THP-1 (Human monocytes) | RMPI | 200 µg/ml |
二、稳定细胞株的筛选:
三、稳定细胞株的维持:(可选取以下方式之一)
注意事项:
保存条件:
-20ºC避光保存,至少一年有效。避免反复冻融。
货号 | BL1881B |
规格 | 5x1ml |
品牌 | Biosharp |
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