2×Taq plus PCR Master Mix含染料

2×Taq plus PCR Master Mix含染料

¥20.00

货号:BL553A

规格:1ml×1支

品牌:Biosharp

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商品详情:

 

2×Taq plus Master Mix含红色染料

产品编号

产品名称

规格

BL553A

2×Taq plus   Master Mix 含红色染料

1 ml

BL553B

2×Taq plus   Master Mix 含红色染料

5×1 ml

BL553C

2×Taq plus   Master Mix 含红色染料

25×1ml

BL553D

2×Taq plus   Master Mix 含红色染料

100×1 ml

注:以50μl PCR反应体系为例,1ml40PCR反应,5ml可做200PCR反应,25ml1000PCR反应,100ml可做4000PCR反应。

 

产品简介:

本制品是将PCR反应所需的Taq酶、dNTPsMg2+以及反应缓冲液预先配制成2倍浓度的混合物。2×Taq plus Master Mix专为常规PCR扩增反应优化,使用时只需再加入模板和引物并用水补足体系至反应浓度为,即可进行PCR反应,大大地简化了操作过程,减少了PCR操作过程中的污染。经测试,染料的加入不影响PCR反应,在PCR反应完成后可直接电泳,节省时间。使用本试剂扩增得到的PCR产物3´端有一突出"A"碱基,可直接克隆于T载体中。

产品特点 

直接上样:含染料PCR产物可直接上样进行凝胶电泳分析;

高度灵敏:高纯度的酶带来优良的灵敏性;

无基因组污染:扩增产物纯度高;

高效扩增:优化的缓冲体系发挥更强的扩增性能;

重复性好:体系预混合,减小加样误差,降低污染机会;

性能稳定:4℃保存3-6个月或室温(25℃)保存2-4周,反复冻融50次,扩增性能无变化;

批次稳定:遵循标准化生产流程,经过严格的质量检测。。

质量保证:

经检测无外源核酸酶残留,qPCR方法检测无大肠杆菌DNA残留,能有效扩增人基因组中的单拷贝基因。

使用说明:

1、冰浴中彻底融化2×Master Mix,混匀后离心快甩将溶液收集到管底。

2、按照下表在0.2ml PCR管中制备反应体系:


50μl反应体系

终浓度

2×Master Mix

25μl

上游引物 10μM

1-5μl

0.2-1.0 μM

下游引物 10μM

1-5μl

0.2-1.0 μM

模板

× μl

1-30ng(质粒)

10ng-1μg(基因组)

补至50μl


3、快甩离心将反应液收集到管底。

4PCR仪如果没有热盖加热的话,补加25μl矿物油。

5PCR仪上执行以下程序:

步骤

温度

时间

循环数

预变性

94

2 min

1

变性

94

30 sec

25-32*

退火

Tm-5*

30 sec

延伸

72

60s/kb

最后延伸

72

5-10 min

1

注: PCR 反应条件视模板、引物等的结构条件不同而各异。在实际操作中需根据模板、目的片段的大小、碱基序列和引物的长短等具体情况,根据比例放大或缩小体系,设定最佳的反应条件(温度、时间等)。

6、电泳检测:含染料的2×Taq plus Master Mix可以直接上样。

注意事项:

1、   需要溶解完全后使用,防止离子浓度不均匀。

2、   菌液 PCR 时预变性时间≥5min,更有利于破壁。

3、   应根据实验目的选择合适循环数,循环数过少,会造成扩增量不足;循环数过多,扩增量增加,但突变率也会增加,并造成非特异性扩增。

4、   根据引物 Tm 值设置合适退火温度,退火温度过低,会造成非特异性扩增;过高可能扩增不出来。

5、   为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。

保存条件:

-20保存两年有效;4稳定贮存6个月。经常使用时,一旦融化后请4贮存,尽量避免反复冻融。

注:如保存温度长期低于-30℃或遇干冰急冻,本产品颜色会变浅直至变黄(与急冻程度相关)。经测试,该变化不影响使用效果。


货号 BL553A
规格 1ml×1支
品牌 Biosharp
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