商品详情:
One-Step RT-PCR Kit(with Dye)
一步法RT-PCR检测试剂盒(含染料)
产品编号 | 产品名称 | 规格 |
BL641A | 一步法RT-PCR检测试剂盒(含染料) | 50T |
BL641B | 一步法RT-PCR检测试剂盒(含染料) | 200T |
产品简介:
本试剂盒采用一步法高效地将RNA反转录成第一链cDNA,并进行PCR扩增。通过PCR技术,以RNA为模板,利用基因特异性引物、One-step RT-PCR Mix和Reaction Buffer合成第一链cDNA后,在热启动DNA聚合酶的作用下检测目的基因的含量。本产品为反转录和PCR反应均在同一管内完成,无需额外开管和移液操作,操作简便快速,最大限度地减少人为误差和人工操作时间,并减少污染风险,提高了检测通量。用户只需自备引物和模板RNA即可。本试剂盒中的5×Reaction Buffer包含必要的离子组分、dNTPs、加样染料、PCR稳定剂和增强剂,One Step RT-PCR Enzyme Mix包含比例优化的逆转录酶、RNA酶抑制剂以及DNA聚合酶。反应体系完成后可直接进行电泳检测。
产品组分
组分 | BL641A(50T) | BL641B(200T) |
One-step RT-PCR Enzyme Mix | 75 μl | 300 μl |
2 × Reaction Buffer with Loading Dye | 500 μl | 2 x 1 ml |
RNase-free ddH2O | 1 ml | 4 x 1 ml |
使用方法:
1. 按照下表配制反应体系
组分 | 体积 |
RNA 模板 | 1-2 μl总RNA |
上游引物GSP(10 μM) | 0.5-1 μl |
下游引物GSP(10 μM) | 0.5-1 μl |
2 × Reaction Buffer with Loading Dye | 10 μl |
One-step RT-PCR Enzyme Mix | 1.5 μl |
RNase-free ddH2O | 补至20 μl |
2. 反应设置
流程 | 温度 | 时间 | 循环数 |
反转录 | 50℃ | 30 min | 1 |
预变性 | 94℃ | 2 min | 1 |
变性 | 94℃ | 30 sec | 30-40 |
退火 | 50-60℃ | 30 sec | |
延伸 | 72℃ | 30-60 s/kb | |
终延伸 | 72℃ | 5-10 min | 1 |
3. 反应体系里已经添加了loading buffer,PCR程序结束后,PCR产物可以直接进行琼脂糖凝胶电泳。
保存条件
-20℃保存,保质期 2 年。
货号 | BL641A |
规格 | 50T |
品牌 | Biosharp |
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