产品简介:
DAPI 是一种可以穿透细胞膜的蓝色荧光染料。和双链 DNA 结合后可以产生比 DAPI
自身强 20 多倍的荧光。和 EB(ethidium bromide)相比,对双链 DNA 的染色灵敏度要高很多
倍。
CAS:28718-90-3
分子式:C16H15N5·2HCl
分子量:350.25
储存条件:2-8℃ 避光储存
外观(性状):黄色粉末
单位:支
纯度:≥95%
有效期:两年
应用:DAPI 染色常用于细胞凋亡检测,染色后用荧光显微镜观察或流式细胞仪检测。
DAPI 也常用于普通的细胞核染色以及某些特定情况下的双链 DNA 染色。 DAPI 的最大激
发波长为 340nm,最大发射波长为 488nm;DAPI 和双链 DNA 结合后,最大激发波长为
364nm,最大发射波长为 454nm。
使用方法:可溶解于水、DMSO 和 DMF。用于细胞核染色时,推荐的 DAPI 工作浓度为
0.5-10μg/ml。建议分装保存,避免反复冻融。
1.配制工作液:用双蒸水或 PBS 稀释母液,配制成所需要的工作的浓度(0.5-10μg/ml)。
2.固定的细胞或组织染色:
对于固定的细胞或组织样品,固定后,适当洗涤去除固定剂。DAPI 染色通常在其他染色的
最后进行。如果不需要进行其它染色,则直接进行 DAPI 染色。
a. 对于贴壁细胞或组织切片:加入适量 DAPI 染色液,覆盖住样品即可。
对于悬浮细胞:至少加入待测染色样品体积 3 倍的染色液,混匀。室温放置 3-5 分钟。
b. 吸除 DAPI 染色液,用 TBST、PBS 或生理盐水洗涤 2-3 次,每次 3-5 分钟。
c. 直接在荧光显微镜下观察或封片后荧光显微镜下观察。激发波长 360nm,发射波长
460nm。3. 活细胞或组织染色:
a. 细胞培养物中加入适量 DAPI 染色液,约 1/10 细胞培养基体积,必须充分覆盖住待染色
的样品。通常对于六孔板一个孔需加入 1ml 染色液,对于 96 孔板一个孔需加入 100μl 染
色液。
b. 在 37℃培养细胞 10~20 分钟。
c. 用 PBS 或合适的缓冲液洗细胞两次。
d. 直接在荧光显微镜下观察或封片后荧光显微镜下观察。激发波长 360nm,发射波长
460nm
注意事项:
1.
DAPI 对人体有一定刺激性,请注意适当防护。
2.
荧光染料都存在淬灭的问题,建议染色后尽量当天完成检测。
3.
为减缓荧光淬灭可以使用抗荧光淬灭封片液。
4.
本产品仅供科研使用。请勿用于医药、临床诊断或治疗,食品及化妆品等用途。
5.
为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。