DiO 即 DiOC18(3)是最常用的细胞膜荧光探针之一，呈现绿色荧光。DiO 是一种亲脂性羰花青(carbocyanine)染料，进入细胞膜后可以侧向扩散逐渐使整个细胞的细胞膜被染色，染色后非常稳定。DiO 毒性很低，通常不会影响细胞的生存力。DiO 在进入细胞膜之前荧光非常弱，仅当进入到细胞膜后才可以被激发出很强的荧光。DiO 被激发后可以发出绿色的荧光，DiO 和磷酯双层膜结合后最大激发波长为 484nm，最大发射波长为 501nm。

本试剂盒可以直接染色活的细胞或组织，染色时间通常为 5-20 分钟。对于固定的细胞或组织，通常宜使用配制在 PBS 中的 4%多聚甲醛进行固定，使用其它不适当的固定液会导致荧光背景较高。DiO对于细胞膜染色的荧光强度通常要低于 DiI，有时对于某些经过固定的组织的染色效果欠佳。

本试剂盒如果用于流式细胞仪，每个样品的检测体系体积为 0.5ml 时，可以进行 200 次检测，96孔板每孔检测体系的体积为 100ul 时，可以进行 1000 次检测。

1、不同细胞的最佳染色浓度略有不同，细胞膜染色工作液的最终浓度建议根据不同细胞系和实验体系进行优化，可在 1:100-1:400 之间进行调整。DiO 的最终浓度提高时，染色增强剂的用量不变。

2、如果染色时间过长或染色后细胞继续培养，探针也可能进入细胞内而染色其它细胞器的膜。

3、染色缓冲液经过过滤除菌处理，在使用时须注意避免微生物污染，否则很可能严重影响染色效果。如果染色缓冲液发生浑浊等明显的微生物污染，就不能继续使用。

4、荧光染料不可避免的都存在一定的淬灭问题，请尽量注意避光，以减缓荧光淬灭。

5、本产品仅限于专业人员的科学研究用，不得用于临床诊断或治疗，不得用于食品或药品。

6、为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

-20℃避光保存，一年有效，避免反复冻融。染色增强剂(400X)和染色缓冲液也可保存在 4ºC。