商品详情:
产品简介:
DiD,DiO,DiI和DiR染料是一族亲脂性的荧光染料,可以用来染细胞膜和其它脂溶性生物结构。当与细胞膜结合后其荧光强度大大增强,这类染料有着很高的淬灭常数和激发态寿命。一旦对细胞染色,这类染料在整个细胞膜上扩散,最佳浓度时可以使整个细胞膜染色。它们的荧光颜色区分明显:DiI(红色荧光),DiO(绿色荧光),DiD(远红外荧光)和 DiR (深红色荧光),这使得他们可以用来对活细胞进行多色成像和流式分析。
DiI在进入细胞膜之前荧光非常弱,仅当进入到细胞膜后才可以被激发出很强的荧光。DiI被激发后可以发出橙红色的荧光,DiI和磷酯双层膜结合后,最大激发波长为549nm,最大发射波长为565nm。 DiI 被广泛用于正向或逆向的,活的或固定的神经等细胞或组织的示踪剂或长期示踪剂。还被用于检测细胞的融合和粘附,检测发育或移植过程中细胞迁移,通过FRAP检测脂在细胞膜上的扩散,检测细胞毒性和标记脂蛋白等。
产品信息:
CAS:41085-99-8
英文名:1,1'-dioctadecyl-3,3,3',3'-tetramethylindocarbocyanine perchlorate
分子式:C59H97ClN2O4
分子量:933.88
使用方法(仅供参考):
一、DiI细胞膜染色液制备
1.配置DMSO或EtOH 储存液:用DMSO或EtOH配置浓度1-2 mM的储存液。
注:未使用的储存液分装储存在-20℃,避免反复冻融,稳定保存6个月;发现较难溶解时可以适当加热,并用超声处理以促进溶解。
2.工作液制备:用合适的缓冲液(如无血清培养基,HBSS或PBS)稀释储存液,配制浓度为1-5 µM的工作液。
注:工作液的最终浓度是根据不同细胞和实验的经验来配制,可以从推荐浓度的十倍以上寻找最佳条件。
二、细胞染色
a. 对于悬浮细胞
1.悬浮细胞密度为1×106/mL加入到工作液中。
2.在37℃培养细胞5~20分钟,不同的细胞最佳培养时间不同。
3.1000-1500rpm离心5分钟。
4.去除上清,再次缓慢加入37℃预温的培养液。
5.重复步骤3和4,两次以上。
b. 对于贴壁细胞
1.吸去多余的培养液。
2.加入染料工作液,轻轻晃动使染料均匀覆盖所有细胞。
3.在37 ℃培养细胞 5~20分钟,不同的细胞最佳培养时间不同。
4.吸去染料工作液,用培养液清洗2~3次,每次用预温的培养基覆盖所有细胞,培养5~10分钟,然后吸干培养基。
三、结果分析
显微镜下观察或流式细胞仪检测
注意事项:
1、荧光染料均存在淬灭问题,请尽量注意避光,以减缓荧光淬灭。
2、Di系列染料是脂溶性染料,在缓冲溶液中容易析出,建议加入表面活性剂(例如F127或者吐温20),终浓度千分之一。
3、本产品仅限于专业人员的科学研究用,不得用于临床诊断或治疗,不得用于食品或药品。
4、为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
保存条件:
-20℃干燥避光保存,有效期一年。
货号 | BL1031A |
规格 | 10mg |
品牌 | biosharp |
说明书下载 | 点击下载 |