商品详情:
产品简介:
鬼笔环肽(Phalloidin)是一种来源于毒蕈类鬼笔鹅膏的环状七肽毒素,以高亲和力选择性结合于丝状肌动蛋白F-actin,而不会与单体肌动蛋白G-actin结合,通常用来标记组织切片、细胞或无细胞体系中的F-actin,从而对F-actin进行定性和定量分析。本产品为FITC标记的鬼笔环肽,染色反应特异性强,对比性高,具有比Actin抗体更好的染色效果。
本产品以溶于甲醇20uM储存液形式提供,推荐工作浓度为80~200 nM。本产品总体积300uL,按照100nM的工作液浓度换算,可以制备总量60mL染色工作液,单次用量为200 μL染色工作液时,可以用于300个样品的检测。
使用方法(仅供参考):
1.工作液的配置:使用1×PBS缓冲液(含1%BSA)稀释储存液到需要的工作浓度即可。
2.细胞爬片生长>24h,使其密度达到50~60%汇合度。
3.吸掉培养液,37℃预热的1×PBS清洗2次。
4.使用4%多聚甲醛溶液进行细胞固定,室温固定10~30min。
注:避免固定剂中含有甲醇成分,因为甲醇在固定过程中可能破坏肌动蛋白。
5.室温条件下,用PBS清洗细胞2~3次,每次10min。
6.室温条件下,用丙酮(≤-20℃)脱水或者用0.5% Triton X-100溶液透化处理5min。
7.室温条件下,用PBS清洗细胞2~3次,每次10min。
8.取 200 µL 配制好的 FITC 标记鬼笔环肽工作液,覆盖住爬片上的细胞,室温避光孵育30 min。
9.用PBS清洗细胞3次,每次5min。
10.使用DAPI溶液对细胞核进行复染,约30s。PBS清洗细胞。
11.使用抗荧光淬灭封片剂进行封片。4℃避光保存,通常6个月内可继续做F-actin染色分析。
注:也可以直接使用含有DAPI的抗荧光淬灭封片剂合并步骤 10和11。
12.荧光显微镜或者共聚焦显微镜下进行荧光观察,选择FITC激发/发射滤片(Ex/Em=496/516nm)和DAPI激发/发射滤片(Ex/Em=364/454nm)。
注意事项:
1、建议对本产品分装并于-20℃避光保存,避免反复冻融。
2、不同的细胞染色情况不同,相应标记鬼笔环肽使用量也需根据不同情况而定。
3、鬼笔环肽具有毒性,需小心操作。
4、本产品仅限于专业人员的科学研究用,不得用于临床诊断或治疗,不得用于食品或药品。
5、为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
保存条件:
-20ºC避光保存,一年有效。
货号 | BL1188A |
规格 | 300T |
品牌 | Biosharp |
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