Lip2000 Transfection Reagent

产品简介：

Lip2000是一种新型的阳离子脂质体转染试剂，适合于将核酸(DNA和RNA)转染至真 核细胞，具有低细胞毒性、对多种类型的细胞都具有高转染效率、转染时血清的存在不影响转染效率的优点。

适用范围：贴壁细胞和悬浮细胞（哺乳动物细胞系）的转染。

质粒DNA的转染：对大多数细胞来说，DNA(µg)与Lip2000(µl)的比例为1:2~1:3。转染时高的细胞密度可以得到高的转染效率和表达水平，并能减少细胞毒性。

使用说明：（以 24 孔板为例）

1、细胞铺板：

贴壁细胞：转染前一天，用500µl不含抗生素的培养基接种0.5-2×10⁵ 细胞，使之第二天能达到 70-90%汇合。  

悬浮细胞：在准备 DNA-Lip2000 复合物之前，用500µl不含抗生素的培养基接种4-8×10⁵细胞即可。

2、对每个转染样品，进行以下操作

（1）在离心管里分别加入50µl无血清培养基（如OPTI-MEM Ⅰ培养基）和0.8 µg DNA，轻柔混匀，制成DNA稀释液。

（2）在另一离心管里分别加入50µl无血清培养基（如OPTI-MEM Ⅰ培养基）和2.0µl Lip2000（注意用前先混匀），轻柔混匀，制成 Lip2000稀释液，室温静置 5 分钟。

（3）将 DNA 稀释液和 Lip2000 稀释液混合，轻柔混匀，室温静置 20分钟，形成DNA-Lip2000 复合物。DNA-Lip2000 复合物在室温下可稳定存在 6 小时。

3、将 DNA-Lip2000 复合物加入到接种好的细胞中，将培养板轻轻地前后摇动，使复

合物分散均匀。

4、在 37℃ CO₂ 培养箱中培养 4-6 小时后更换培养基，继续培养18-48 小时

5、如果要筛选稳定细胞株，则在转染24小时后将细胞按照1:10 或更高的比例接种到新鲜培养基中，第二天加入选择性培养基进行筛选。

质粒 DNA 转染的优化：为达到最高的转染效率和降低细胞毒性的影响，可以对 DNA 和 Lip2000 的比例以及细胞密度进行优化，一般在1:0.5~1:5 的范围内优化DNA (µg) 和 Lip2000 (µl) 的比例。

不同细胞培养板中转染时培养基、核酸及Lip2000用量:

细胞培养板	每孔面积	培养基用量		DNA 转染		siRNA
		铺板培养基用量	稀释培养基用量
96-well	0.3 cm2	100 ul	2 × 25 µl	0.2µg	0.5µl	5 pmol	0.25µl
24-well	2 cm2	500 ul	2 × 50µl	0.8µg	2.0µl	20 pmol	1.0µl
12-well	4 cm2	1 ml	2 × 100µl	1.6µg	4.0µl	40 pmol	2.0µl
6-well	货号 BL623D 规格 1.5ml 品牌 Biosharp 说明书下载 点击下载 产品推荐 new 96孔无裙边透明高位PCR板 ￥65.00 new 50ml螺口尖底离心管(非灭菌）经济款 ￥18.00 new 100ml插口圆底离心管 ￥60.00 new 1.5ml螺旋冻存管/样品管(不含管盖） ￥278.00