商品详情:
产品简介:
本试剂盒用于从培养细菌中提取蛋白,其中的裂解缓冲液含有蛋白酶抑制剂,作用温和,提取过程简便高效。获得的蛋白可用于Western Blot、免疫共沉淀等后续研究。
产品组分:
产品编号 | 产品名称 | 规格 | 保存条件 |
BL1586A-1 | Lysis Buffer | 50ml | 2-8℃ |
BL1586A-2 | 蛋白酶抑制剂混合物 | 50µl | -20℃ |
BL1586A-3 | 1M DTT | 50µl | -20℃,避光 |
BL1586A-4 | PMSF(100mM) | 500µl | -20℃ |
使用方法(仅供参考):
1、菌液离心收集菌体后,用PBS将菌沉淀重悬洗涤2~3次;
2、Lysis工作液配制:1ml冷Lysis Buffer加1µl蛋白酶抑制剂、1µl DTT和10µl PMSF混匀,冰上保存待用;
3、按原菌液体积1/5~1/10加入Lysis工作液重悬菌体,4℃孵育10min;冰浴超声(超声条件可参考:300w,超声10s,停止10s,共20min,至超声完全,具体可视实际情况而定);如无超声条件可反复冻融3次;
注意:判断是否超声完全方法:(1)外观判断:超声前菌悬液浑浊,超声完全后变得透明、清澈。(2)液体的粘滞性:超声后菌液从枪头滴下不粘连。(3)高速离心(一般用6,000g 10min),沉淀是未破碎或破碎不完全的菌体。(4)染色:破碎后的菌液涂片,革兰氏结晶紫溶液染色0.5min,镜检。
4、4℃,14000rpm离心10min,收集上清为蛋白提取物,蛋白定量(Bradford法、BCA法);
5、蛋白提取物分装保存于-70℃,避免反复冻融。
注意事项:
1、所有接触样品的用具及试剂均需预冷。
2、提取蛋白后,如有必要,可透析除去表面活性剂。
3、如果超声时出现黑色沉淀,说明超声功率太强。
4、超声时间太长、功率太高对蛋白活性会有影响。
5、超声时尽量防止泡沫的产生。
6、本产品仅限于专业人员的科学研究用,不得用于临床诊断或治疗,不得用于食品或药品,不得存放于普通住宅内。
7、为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
保存条件:
-20℃保存,1年有效。
新商城商品分类:实验室试剂 蛋白样品制备 蛋白提取试剂
关键词:
BC3750-50T_BB-3123-50T_C600596-0002_P9160-50T-PKG_KGB5308-50_细菌总蛋白提取试剂盒
关联产品:
BL1054A|BL521A|BL1434A|BL1320A|BL509A
说明书:
见附件
货号 | BL1586A |
规格 | 50T |
品牌 | Biosharp |
说明书下载 | 点击下载 |