总蛋白提取试剂盒

总蛋白提取试剂盒

¥410.00

货号:BL1589A

规格:50T

品牌:Biosharp

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商品详情:

产品简介:

本试剂盒用于从哺乳动物组织和培养细胞中提取全蛋白,用含有蛋白酶抑制剂及磷酸酶抑制剂的裂解缓冲液LysisBuffer匀浆裂解组织或细胞,作用温和,提取过程简便高效。获得的全蛋白可用于Western Blot、免疫共沉淀等后续研究,但不能用于蛋白激酶及磷酸酶免疫共沉淀的研究,因本试剂盒中包括这两种酶的抑制剂。

 

产品组分:

产品编号

产品名称

规格

保存条件

BL1589A-1

Lysis Buffer

50ml

2-8℃

BL1589A-2

100×磷酸酶抑制剂

500μl

-20℃

BL1589A-3

1000×蛋白酶抑制剂

50μl

-20℃

BL1589A-4

PMSF100mM

500μl

-20℃

 

使用方法(仅供参考)

一、组织蛋白的提取

1、在每1mlLysis Buffer加入10μl磷酸酶抑制剂,1μl蛋白酶抑制剂和10μl 100mM PMSF,混匀。冰上保存数分钟待用。

2、100mg固体组织置于培养皿中,手术剪剪碎成3mm×3mm左右的小块,加入0.51mlLysis Buffer,玻璃匀浆器上下手动匀浆30-50次,注意低温操作;

3、取组织匀浆液转移到1.5ml预冷的离心管,离心12,000g4℃离心5 min

4、取上清转移至新的预冷的离心管中,即为全蛋白提取物,蛋白定量(Bradford法、BCA法);

5、分装保存于-70℃,避免反复冻融。

二、培养细胞蛋白的提取

1、贴壁培养的细胞,吸去培养基后,加入10ml/150mm培养板的冷PBS洗两次,每次振摇数次以尽量去除培养液;

2、悬浮培养的细胞或用细胞刮子刮下的贴壁细胞,将细胞及培养液移至离心管中,500g~800g离心10min,再用10ml/150mm培养板的冷PBS500g~800g离心5min洗两次;

3、在每1mlLysis Buffer加入10μl磷酸酶抑制剂,1μl蛋白酶抑制剂和5μl 100mM PMSF,混匀。冰上保存数分钟待用。

4、细胞洗涤后,转至新的预冷的离心管中,加入上述配制好的冷Lysis Buffer,加入量如下表所示:

细胞数量

培养板或培养瓶的规格

Lysis Buffer加入量

107

100mm培养板或150cm2培养瓶

1ml2ml

5×106

60mm培养板或75cm2培养瓶

0.5ml1ml

5、置于4℃摇床平台上,剧烈振荡30s,放置冰上4min,重复5次;

6、12,000g4℃离心5min,取上清为全蛋白提取物,蛋白定量(Bradford法、BCA法);

7、分装保存于-70℃,避免反复冻融。

 

注意事项

1所有接触样品的用具及试剂均需预冷。

2提取蛋白后,如有必要,可透析除去表面活性剂。

3本产品仅限于专业人员的科学研究用,不得用于临床诊断或治疗,不得用于食品或药品,不得存放于普通住宅内。

4为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。

 

保存条件:

-20℃保存,1年有效。

 

新商城商品分类:实验室试剂   蛋白样品制备   蛋白提取试剂

 

关键词:

BB-3101-50T_BC3710-50T_C510003-0050_P9157-50T-PKG_W034-1-1_KGB5303-50_动物全蛋白提取试剂盒

 

关联产品:

BL1054A|BL521A|BL1434A|BL1320A|BL509A

 

说明书

见附件

货号 BL1589A
规格 50T
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