One-Luc萤火虫萤光素酶报告基因检测试剂盒

One-Luc萤火虫萤光素酶报告基因检测试剂盒

¥500.00

货号:BL1607A

规格:100T

品牌:Biosharp

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商品详情:

产品简介:

萤火虫萤光素酶是一种分子量约为61kD的蛋白,在ATP、镁离子和氧气存在的条件下,可以催化luciferin氧化成oxyluciferin,在luciferin氧化的过程中,会发出波长为560nm左右的生物萤光。生物萤光可以通过化学发光仪或液闪测定仪进行测定。通过萤光素和萤光素酶这一生物发光体系,可以非常灵敏、高效地检测基因的表达。通常把感兴趣基因的转录调控元件或5启动子区克隆在luciferase的上游,或把3-UTR区克隆在luciferase的下游等,构建成报告基因质粒。然后转染细胞,用适当药物等处理细胞后裂解细胞,测定萤光素酶活性。通过萤光素酶活性的高低来判断药物等处理对目的基因的转录调控作用。

One-Luc萤火虫萤光素酶报告基因检测试剂盒是一种无需洗涤或收集细胞的通过化学发光法直接测定细胞内萤火虫萤光素酶活性的超高灵敏度、高信号稳定性的一步法检测试剂盒。配制好的萤火虫萤光素酶检测试剂,按照与培养液等体积的比例加入到细胞培养板内反应5分钟,即可进行化学发光检测。本试剂盒使用灵活便捷、检测灵敏度高、测定样品的线性范围宽。另外,本产品也可以用于裂解并收集保存的细胞样品的检测。

本产品的One-Luc萤火虫萤光素酶检测底物为冻干粉,使用前需要使用提供的缓冲液充分溶解底物冻干粉后才能使用。

 

产品特点

检测灵敏度高,测定样品的线性范围宽96孔板中,通常本产品可以在20万个细胞范围内呈现良好的线性关系。不同的细胞、不同的萤光素酶表达水平时的检测细胞数量的上限可能有所差异,当萤火虫萤光素酶表达水平很高时,可能只在10万个细胞范围有良好的线性关系,但是化学发光读数还是会随着细胞数量的增加而继续升高的。

操作简单,读数稳定,检测速度快,完成整个检测流程仅需约10分钟本产品比其它萤光素酶测定方法更加简单快捷,细胞可以在同一块多孔板中培养和检测,无需洗涤细胞,也无需更换或去除培养液,只需用试剂盒提供的检测缓冲液把检测底物(冻干粉)充分溶解后配制成萤火虫萤光素酶检测试剂后,与培养细胞等体积混合,反应5分钟后即可进行化学发光检测。并且产生的化学发光信号十分稳定,在反应开始60分钟后仍可保留60%以上的信号。使用可以测定96孔板的化学发光的多功能酶标仪通常在2分钟内就可以完成一块96孔板的检测。

稳定性好本产品在-20℃可以长期保存,配制成One-Luc萤火虫萤光素酶检测试剂后的稳定性也非常好,反复冻融5次对检测效果无明显影响,反复冻融10次检测效果下降不超过10%One-Luc萤火虫萤光素酶检测试剂在4℃条件下保存3天检测效果下降不超过20%,保存7天仍可保留60%以上的检测效果。在室温保存1天可保留70%以上的检测效果,室温保存3天可保留55%以上的检测效果,在37℃保存1天可保留50%以上的检测效果。One-Luc萤火虫萤光素酶检测试剂即使仅保留约50%的检测效果,仍可以满足各种常规检测。

使用灵活便捷本产品不仅适合少量样品的检测,也非常适合大量样品的高通量检测。本产品可以等体积加入到细胞培养孔中进行直接检测。

兼容性强本产品兼容各种常见培养液,正常培养液中的酚红、10%以内的胎牛血清或小牛血清、2%以内的DMSO或乙醇对信号和稳定性基本没有影响,常用的盐类或金属离子在正常浓度下也基本没有影响。

 

产品组分

产品编号

产品名称

BL1607A

BL1607B

1

One-Luc萤火虫萤光素酶检测缓冲液

10ml

100ml

2

One-Luc萤火虫萤光素酶检测底物

1

1

 

使用方法:请参考说明书

 

注意事项

1、检测缓冲液和检测底物混合后配制成的One-Luc萤火虫萤光素酶检测试剂,-80℃避光保存,至少一年有效;-20℃避光保存,推荐3-6个月内使用。

2、由于萤光素酶的活性对温度比较敏感,所以反应前细胞和检测试剂均需达到室温后再进行测定。可将检测试剂在室温或不超过25℃的水浴中融解并混匀后使用。

3、尽管经测试检测缓冲液和检测底物混合后配制成的One-Luc萤火虫萤光素酶检测试剂反复冻融5次对于检测效果无显著影响,为保证检测试剂的稳定性、取得良好的使用效果,建议现用现配。没有用完的检测试剂可以采取适当分装后避光保存的方法,以避免反复冻融和长时间暴露于室温。反复冻融过程中,可能会导致检测试剂中出现少量沉淀,此时宜平衡至室温,并尽量溶解。如仍有残留的不溶物,可以离心去除后使用,经测试不会影响后续的检测效果。

4、请使用适合于细胞培养的白色或黑色的96孔板或384孔板。如果使用普通透明的96孔板或384孔板,相邻孔之间会产生相互干扰。

5、待测药物的溶剂含量较高时可能会干扰萤光素酶反应,从而影响化学发光信号。可以通过设置含有溶剂的细胞培养液对照孔排除溶剂的干扰。经测试,最终反应体系中DMSO含量在2%以内不会对反应产生影响。

6、本产品仅限于专业人员的科学研究用,不得用于临床诊断或治疗,不得用于食品或药品,不得存放于普通住宅内。

7、为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。

 

保存条件:

-20℃避光保存,一年有效。

货号 BL1607A
规格 100T
品牌 Biosharp
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