商品详情：

产品简介：

海肾萤光素酶是一种分子量约为36kD的蛋白，在氧气存在的条件下，可以催化腔肠素氧化成Coelenteramide。在Coelenterazine氧化的过程中，会发出波长为480nm左右的生物萤光。生物萤光可以通过化学发光仪或液闪测定仪进行测定。通过萤光素和萤光素酶这一生物发光体系，可以非常灵敏、高效地检测基因的表达。通常把感兴趣基因的转录调控元件或5′启动子区克隆在luciferase的上游，或把3′-UTR区克隆在luciferase的下游等，构建成报告基因质粒。然后转染细胞，用适当药物等处理细胞后，测定萤光素酶活性。通过萤光素酶活性的高低来判断药物处理等对目的基因的转录调控作用。海肾萤光素酶一方面常用作萤火虫萤光素酶报告基因检测的内参，以消除由于质粒的转染效率不同而带来的误差；另一方面海肾萤光素酶也可以和萤火虫萤光素酶一样被用于常规的报告基因检测。

Renilla-Luc海肾萤光素酶报告基因检测试剂盒是一种无需洗涤或收集细胞的通过化学发光法直接测定细胞内海肾萤光素酶活性的超高灵敏度、高信号稳定性的一步法检测试剂盒。与培养液等体积的检测试剂加入到细胞培养板内反应5分钟，即可进行化学发光检测。本试剂盒使用灵活便捷、测定样品的线性范围宽、检测灵敏度高，特别适合于海肾萤光素酶表达水平较低的样品检测。另外，本产品也可以用于裂解并收集保存的细胞样品的检测。

产品特点：

检测灵敏度高，测定样品的线性范围宽：96孔板中，通常本产品可以在20万个细胞范围内呈现良好的线性关系。不同的细胞、不同的萤光素酶表达水平时的检测细胞数量的上限可能有所差异，当海肾萤光素酶表达水平很高时，可能只在10万个细胞范围内有良好的线性关系，但是化学发光读数还是会随着细胞数量的增加而继续升高的。

操作简单，读数稳定，检测速度快，完成整个检测流程仅需约10分钟：本产品比其它海肾萤光素酶测定方法更加简单快捷。细胞可以在同一块多孔板中培养和检测，无需洗涤细胞，也无需更换或去除培养液，只需把试剂盒提供的Renilla-Luc海肾萤光素酶检测底物和Renilla-Luc海肾萤光素酶检测缓冲液按照1:100的比例混合配制成Renilla-Luc海肾萤光素酶检测工作液，再与培养的细胞等体积混合，反应5分钟后即可进行化学发光检测。

稳定性好：本试剂盒中的Renilla-Luc海肾萤光素酶检测缓冲液稳定性好，反复冻融10次、4℃或室温保存3天对检测效果基本无影响。37℃保存1天，仍可保留90%以上的检测效果。

使用灵活便捷：本产品不仅适合少量样品的检测，也非常适合大量样品的高通量检测。本产品可以等体积加入到细胞培养孔中进行直接检测。

兼容性强：本产品兼容各种常见培养液，正常培养液中的酚红、10%以内的胎牛血清或小牛血清、2%以内的DMSO或乙醇对信号和稳定性基本没有影响，常用的盐类或金属离子在正常浓度下也基本没有影响。

产品组分：

使用方法：请参考说明书

注意事项：

1、Renilla-Luc海肾萤光素酶检测缓冲液，-20℃保存一年有效；Renilla-Luc海肾萤光素酶检测底物（100×），-20℃避光保存6个月有效，-80℃避光保存一年有效。

2、本产品的化学发光信号随时间的变化衰减较快，半衰期仅约15分钟，为取得比较满意的检测效果请严格控制检测时间，尽量在加入检测试剂后5到10分钟内进行检测。

3、由于萤光素酶的活性对温度比较敏感，所以反应前细胞、Renilla-Luc海肾萤光素酶检测缓冲液均需达到室温后再进行测定。可将检测缓冲液在室温或不超过25℃的水浴中融解并混匀后使用。

4、本试剂盒中的Renilla-Luc海肾萤光素酶检测缓冲液在反复冻融过程中，可能会导致检测试剂中出现少量沉淀，此时宜平衡至室温，并尽量溶解。如仍有残留的不溶物，可以离心去除后使用，经测试不会影响后续的检测效果。

5、请使用适合于细胞培养的白色或黑色的96孔板或384孔板。如果使用普通透明的96孔板或384孔板，相邻孔之间会产生相互干扰。

6、Renilla-Luc海肾萤光素酶检测底物（100×）配制在无水乙醇中。由于无水乙醇容易挥发，有时会在初次使用时发现体积明显小于0.1ml的情况，此时用无水乙醇把体积补足至0.1ml，并混匀后即可使用。

7、Renilla-Luc海肾萤光素酶检测工作液宜配制后立即使用。如不能立即使用，-20℃可以保存一周。随着保存时间的延长检测效果会不断下降，因此不可配制成工作液后长期保存。

8、待测药物的溶剂含量较高时可能会干扰萤光素酶反应，从而影响化学发光信号。可以通过设置含有溶剂的细胞培养液对照孔排除溶剂的干扰。经测试，最终反应体系中DMSO含量在2%以内不会对反应产生影响。

9、本产品仅限于专业人员的科学研究用，不得用于临床诊断或治疗，不得用于食品或药品，不得存放于普通住宅内。

10、为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

保存条件：

-80℃避光保存，一年有效。