商品详情：

产品简介：

萤火虫萤光素酶是一种分子量约为61kD的蛋白，在ATP、镁离子和氧气存在的条件下，可以催化luciferin氧化成oxyluciferin，在luciferin氧化的过程中，会发出波长为560nm左右的生物萤光。海肾萤光素酶是一种分子量约为36kD的蛋白，在氧气存在的条件下，可以催化腔肠素氧化成coelenteramide，在腔肠素氧化的过程中会发出波长为480nm左右的生物萤光。生物萤光可以通过化学发光仪或液闪测定仪进行测定。通过萤光素酶和其底物这一生物发光体系，可以非常灵敏、高效地检测基因的表达。通常把感兴趣基因的转录调控元件或5′启动子区克隆在luciferase的上游，或把3′-UTR区克隆在luciferase的下游等，构建成报告基因质粒。然后转染细胞，用适当药物等处理细胞后裂解细胞，测定萤光素酶活性。通过萤光素酶活性的高低来判断药物处理等对目的基因的转录调控作用。海肾萤光素酶相对更多地被用作转染效率的内参，以消除细胞数量和转染效率的差异。

Dual-Luc双萤光素酶报告基因检测试剂盒是一种无需洗涤或收集细胞的用化学发光法先后直接测定细胞内萤火虫萤光素酶和海肾萤光素酶的高灵敏度、高信号稳定性的双萤光素酶报告基因检测试剂盒。本试剂盒提供的Dual-Luc萤火虫萤光素酶检测试剂，为冻干粉版本，使用前使用提供的缓冲液充分溶解底物冻干粉后使用。配制好的Dual-Luc萤火虫萤光素酶检测试剂和Dual-Luc海肾萤光素酶检测试剂，按照与培养液等体积的比例分别加入到细胞培养板内反应10分钟，即可进行两次化学发光检测。本试剂盒使用灵活便捷、检测灵敏度高、测定样品的线性范围宽，性能优越。另外，本产品也可以用于裂解并收集保存的细胞样品的检测。

产品特点：

操作简单，读数稳定，检测速度快，完成整个检测流程仅需约20分钟：本产品比其它双萤光素酶测定方法更加简单快捷，细胞可以在同一块多孔板中培养和检测，无需洗涤细胞，无需更换或去除培养液，也无需裂解和收集细胞样品，只需把试剂盒提供的Dual-Luc萤火虫萤光素酶检测试剂及Dual-Luc海肾萤光素酶检测底物和Dual-Luc海肾萤光素酶检测缓冲液按照1:100的比例混合配制成Dual-Luc海肾萤光素酶检测工作液，再先后与培养的细胞等体积混合，每次反应10分钟后即可进行化学发光检测。并且化学发光非常稳定，在反应开始后的30分钟内，萤火虫萤光素酶的信号下降不超过20%，海肾萤光素酶的信号下降不超过30%，反应至60分钟两种萤光素酶均可保持60%以上的信号。

本产品的Dual-Luc海肾萤光素酶检测试剂对萤火虫萤光素酶的淬灭效果好。本试剂盒中的Dual-Luc海肾萤光素酶检测试剂中含有抑制萤火虫萤光素酶催化luciferin发光的物质，Dual-Luc海肾萤光素酶检测试剂加入后、通过简单的混匀，就可以抑制约99.9%以上的萤火虫萤光素酶信号，大大提高了后续海肾萤光素酶活性检测的精准性。

稳定性好：本产品在-20℃可以长期保存，配制成Dual-Luc萤火虫萤光素酶检测试剂后的稳定性、Dual-Luc海肾萤光素酶检测缓冲液和Dual-Luc海肾萤光素酶检测底物（100×）的稳定性都比较好。Dual-Luc萤火虫萤光素酶检测试剂反复冻融5次对检测效果基本无影响，反复冻融10次检测效果下降不超过5%；4℃保存1天检测效果下降不到10%，4℃保存3天检测效果下降不超过30%；室温保存1天可保留75%以上的检测效果，室温保存3天可保留50%以上的检测效果；37℃保存1天可保留60%以上的检测效果。Dual-Luc海肾萤光素酶检测缓冲液反复冻融10次检测效果下降不到10%，4℃和室温保存3天、37℃保存1天，对检测效果的影响均不超过5%。Dual-Luc海肾萤光素酶检测底物（100×）在4℃保存1周、室温保存1天检测效果下降不到10%，室温保存3天、37℃保存1天，仍可保留80%以上的活力。

使用灵活便捷：本产品不仅适合少量样品的检测，也非常适合大量样品的高通量检测。本产品可以等体积加入到细胞培养孔中进行直接检测。

兼容性强：本产品兼容各种常见培养液，正常培养液中的酚红、10%以内的胎牛血清或小牛血清、2%以内的DMSO或乙醇对信号和稳定性基本没有影响，常用的盐类或金属离子在正常浓度下也基本没有影响。

产品组分：

使用方法：参考说明书

注意事项：

1、Dual-Luc萤火虫萤光素酶检测底物和海肾萤光素酶检测底物（100×）须-20℃避光保存。Dual-Luc萤火虫萤光素酶检测缓冲液和检测底物混合后配制成的Dual-Luc萤火虫萤光素酶检测试剂，-80℃避光保存，至少一年有效；-20℃避光保存，推荐3-6个月内使用。

2、由于萤光素酶的活性对温度比较敏感，所以反应前细胞和检测试剂均需达到室温后再进行测定。可将Dual-Luc萤火虫萤光素酶检测缓冲液和Dual-Luc海肾萤光素酶检测缓冲液在室温或不超过25℃的水浴中融解并混匀后再与检测底物混合成检测试剂使用。

3、尽管经测试Dual-Luc萤火虫萤光素酶检测缓冲液和检测底物混合后配制成的Dual-Luc萤火虫萤光素酶检测试剂反复冻融5次对于检测效果无显著影响，为保证检测试剂的稳定性、取得良好的使用效果，建议现用现配。没有用完的检测试剂可以采取适当分装后避光保存的方法，以避免反复冻融和长时间暴露于室温。Dual-Luc海肾萤光素酶检测试剂在反复冻融过程中，可能会导致检测试剂中出现少量沉淀，此时宜平衡至室温，并尽量溶解。如仍有残留的不溶物，可以离心去除后使用，经测试不会影响后续的检测效果。

4、请使用适合于细胞培养的白色或黑色的96孔板或384孔板。如果使用普通透明的96孔板或384孔板，相邻孔之间会产生相互干扰。

5、Dual-Luc海肾萤光素酶检测底物（100×）配制在含有高浓度乙醇的溶液中。由于乙醇容易挥发，有时会在初次使用时发现体积明显小于所标示的包装体积100μl或1ml的情况，此时用无水乙醇把体积补足至100μl或1ml，并混匀后即可使用。

6、Dual-Luc海肾萤光素酶检测试剂宜配制后立即使用。如不能立即使用，-20℃可以保存一周。随着保存时间的延长检测效果会不断下降，因此不可配制成检测试剂后长期保存。

7、待测药物的溶剂含量较高时可能会干扰萤光素酶反应，从而影响化学发光信号。可以通过设置含有溶剂的细胞培养液对照孔排除溶剂的干扰。经测试，最终反应体系中DMSO含量在2%以内不会对反应产生影响。

8、本产品仅限于专业人员的科学研究用，不得用于临床诊断或治疗，不得用于食品或药品，不得存放于普通住宅内。

9、为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

保存条件：

-20℃保存，一年有效。