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产品简介：

Hela细胞专用转染试剂是采用独特配方的阳离子型转染试剂，具有高效、低毒和易于使用等优点，用于Hela细胞的瞬时转染和稳定细胞系构建（立传立转）。

本转染试剂区别于常规转染试剂的两个最主要特点是：（1）可以在贴壁细胞传代后尚未贴壁时立即进行转染（立传立转）；（2）转染操作可在一分钟内完成。

使用方法：

• 将新鲜消化的Hela细胞接种到24孔细胞板中，每孔1~2×10⁵细胞，1ml完全培养基。可在生长旺盛的细胞传代后直接按下述步骤2~5进行转染，无需18~24小时的等候时间。
• 将1~2μg质粒DNA和3~5μl转染试剂分别稀释到50μl生理盐水中。

注意：质粒DNA和转染试剂的最适用量需要根据不同培养基来优化，但理论上不超出1~2µg和3~5µl范围。

• 合并上述两溶液并混匀。混匀后直接加入到细胞培养基中，用加样器吸打混匀。

注意：转染试剂和质粒混合后无需室温静置孵育，可直接加入含血清的细胞培养基中进行转染。

• 将细胞板移至37ºC/5% CO₂孵箱中进行培养。无需在转染后4~6小时补加血清或更换培养基。
• 24~72小时后根据实验需要进行瞬时表达分析或稳定细胞系加压筛选。

表1 不同培养体积对应的待转DNA、转染试剂、培养基用量一览表（仅供参考，建议优化）

注意事项：

• 质粒DNA：请用能够去除内毒素的方法制备高质量的质粒DNA。
• 稀释液：85%（W/V）生理盐水，用低内毒素纯水配制，高压消毒或除菌过滤。
• 培养基：经过DMEM、RPMI-1640和M199等常规培养基测试，推荐使用含5~10%牛血清的DMEM，若转染效果不理想可尝试其它培养基。
• 以24孔细胞板转染实验为例，推荐每孔低内毒素质粒DNA用量为1~2µg，转染试剂用量为3~5µl，请在正式实验前根据不同细胞和不同培养基用报告基因进行优化。
• 立传立转要求使用生长旺盛的细胞，即细胞生长至80-90%成片或刚长满。若使用生长过老的细胞，将明显影响立传立转的效率。
• 本产品仅限于专业人员的科学研究用，不得用于临床诊断或治疗，不得用于食品或药品，不得存放于普通住宅内。
• 为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

保存条件：

4ºC保存，有效期18个月。