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产品简介：

本转染试剂是一类快捷高效即用型试剂，仅需将细胞培养液与siRNA或miRNA等需要转染的目的小RNA同转染试剂混合，室温孵育约2min后加入完全细胞培养液中即可，无需更换新培养液。

使用方法：

一、接种细胞

对于贴壁细胞，转染前18-24h进行铺板，本转染试剂要求细胞铺板密度不高，建议70%-90%为佳。

注意：培养液中的血清不影响转染效率。转染试剂使用量受细胞类型及其他实验条件影响，建议初次使用时设置梯度进行优化最佳使用量。

二、准备转染试剂-目的小RNA（siRNA或miRNA等）复合物

1、对于每孔细胞，将20pmol待转染目的小RNA（siRNA或miRNA等）稀释到50μl基础培养基或完全培养基中（无需额外的Opti-MEM培养基），混匀。

2、对于每孔细胞，将1.25-2.5μl（视细胞类型调整）转染试剂添加到上述步骤1中的混合培液中，轻轻混匀。

3、室温孵育约2min。

三、转染细胞

1、若转染前细胞培养基变黄，需将孔板中的完全培养液换新，或换成2% FBS培养基能提高转染效率。

2、将上述孵育完成的转染复合物均匀滴入到含细胞的培养皿中。轻轻晃动培养皿或轻微振荡，让转染复合物分散均匀。

3、在37℃，5% CO₂培养箱培养24-48h，无需更换新的培养液，之后即可对转入基因表达分析。

表 1：不同培养体积对应的待转RNA、转染试剂、稀释液用量

注意：该表使用量仅供参考，具体使用量还需根据细胞类型及其他实验条件进行优化。

注意事项：

• 本试剂不可冷冻！
• 小RNA（siRNA或miRNA等）请务必使用高纯度无内毒素转染级RNA。
• 使用适当保存和经常传代的健康细胞。确保细胞没有被细菌、真菌或支原体污染。如果细胞是近期复苏的液氮冻存细胞，请在转染前至少传代两次。
• 本转染试剂可用于有血清培养基的转染，并且转染后不需要更换培养基。确保细胞培养液没有被细菌、真菌或支原体污染。
• RNA浓度和转染试剂使用量受细胞类型及其他实验条件影响，初次使用应优化RNA浓度和转染试剂量以得到最大的转染效率。使用者可尝试每20pmol RNA使用1～4μl体积的转染试剂进行优化。
• 本产品仅限于专业人员的科学研究用，不得用于临床诊断或治疗，不得用于食品或药品，不得存放于普通住宅内。
• 为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

保存条件：

4℃保存，一年有效。避免冷冻。